Wstępna charakterystyka bakteriofaga Serratia φOS10/Wyniki i dyskusja/Uzyskanie czystych kultur fagowych z próbki środowiskowej metodą szalek dwuwarstwowych i określenie ich morfologii

5.1 Uzyskanie czystych kultur fagowych z próbki środowiskowej metodą szalek dwuwarstwowych i określenie ich morfologii

 W celu uzyskania pojedynczych łysinek stosowano metodę szalek dwuwarstwowych opisaną w Podrozdziale 4.1 oraz jako gospodarzy używano szczepy Serratia spp. OS10 i W54. Uzyskane łysinki, na szalkach z ich policzalną ilością, porównano pod kątem ich morfologii, a wybrane nazwano od „Ł1” do „Ł10”. Niejednolita morfologia sugerowała, że w testowanej próbce znajdują się co najmniej dwa różne fagi (Tabela 8).

Tabela 8. Opis morfologii wyizolowanych łysinek.

Nazwa	Opis morfologii	gospodarz
Ł1	Mała, ø=0,5mm	OS10
Ł2	Duża, ø=1mm, mętna w środku, okrągła	OS10
Ł3	Duża, ø=0,9mm, okrągła z jednym rożkiem	OS10
Ł4	Duża, ø=0,9mm, lekko owalna, mętna w środku, przejrzysta na obwodzie	W54
Ł5	Mała, ø=0,2mm, okrągła, przejrzysta	OS10
Ł6	Mała, ø=0,5mm, kwadratowa, przejrzysta	W54
Ł7	Średnia, ø=0,8mm, 5-kątna, mętna w środku, przejrzysta na krawędzi	W54
Ł8	Duża, ø=0,9mm, okrągła, cała mętna	OS10
Ł9	Mała, ø=0,4mm, okrągła, duży przejrzysty obwód, mały mętny środek	OS10
Ł10	Mała, ø=0,5mm, okrągła, przejrzysta w pełni	OS10

Zwrócono uwagę, że większość łysinek, niezależnie od wielkości, była mętna, zaś wokół krawędzi łysinki Ł9 zaobserwowano wyraźnie przejrzystą strefę. Ten fakt stał się pierwszą przesłanką do postawienia hipotezy, iż w badanej próbce obecne były bakteriofagi łagodne. Materiał z kilku pojedynczych łysinek różniących się morfologią posłużył do namnożenia i izolacji cząstek fagowych (metoda opisana w Podrozdziale 4.2). Uzyskane zawiesiny były następnie mianowane (Podrozdział 4.1) z wykorzystaniem tych samych co wcześniej (patrz wyżej) gospodarzy.